Применение
Фермент Hot Start Taq ДНК-полимераза c антителами может применяться для различных ПЦР, включая ПЦР в реальном времени (Real-Time PCR) с использованием TaqMan и SYBR Green. Максимальная длина амплифицированного фрагмента может достигать 5000 п.н.
Источник
Фермент выделен из штамма E.coli, несущего рекомбинантную плазмиду, содержащую рекомбинантный ген ДНК-полимеразы из Thermus aquaticus.
Описание
Hot Start Taq ДНК-полимераза c антителами представляет собой смесь из термостабильной Taq ДНК-полимеразы и специфичных моноклональных антител. В этой смеси антитела находятся в комплексе с активным центром Taq ДНК-полимеразы, обеспечивая блокирование активности фермента. Это обстоятельство снижает возможность неспецифической полимеразной активности во время приготовления реакционной смеси. Во время начальная стадия ПЦР (денатурации) происходит диссоциация комплекса и моноклональные антитела необратимо денатурируют, а Taq ДНК-полимераза становится функционально активной (выше 60°С). Фермент катализирует матричный синтез ДНК путем переноса нуклеотида от дНТФ на 3’-конец ДНК.
Условия хранения
Фермент Taq ДНК-полимеразу рекомендуется хранить при -20°C. Срок годности 1 год с даты проверки.
Контроль качества
ПЦР (активность), SDS-PAGE (качество очистки фермента), тест на нуклеазную активность, тест хранения при 25°С, тест на контаминацию E. сoli.
Условия хранения
Фермент Taq ДНК-полимеразу рекомендуется хранить при -20°C. Срок годности 1 год с даты проверки.
Контроль качества
ПЦР (активность), SDS-PAGE (качество очистки фермента), тест на нуклеазную активность, тест хранения при 25°С, тест на контаминацию E. сoli.
Рекомендуемые условия реакции
Фермент Hot Start Taq ДНК-полимераза c антителами может применяться для различных ПЦР, включая ПЦР в реальном времени (Real-Time PCR) с использованием TaqMan и SYBR Green. Максимальная длина амплифицированного фрагмента может достигать 5000 п.н.
Источник
Фермент выделен из штамма E.coli, несущего рекомбинантную плазмиду, содержащую рекомбинантный ген ДНК-полимеразы из Thermus aquaticus.
Описание
Hot Start Taq ДНК-полимераза c антителами представляет собой смесь из термостабильной Taq ДНК-полимеразы и специфичных моноклональных антител. В этой смеси антитела находятся в комплексе с активным центром Taq ДНК-полимеразы, обеспечивая блокирование активности фермента. Это обстоятельство снижает возможность неспецифической полимеразной активности во время приготовления реакционной смеси. Во время начальная стадия ПЦР (денатурации) происходит диссоциация комплекса и моноклональные антитела необратимо денатурируют, а Taq ДНК-полимераза становится функционально активной (выше 60°С). Фермент катализирует матричный синтез ДНК путем переноса нуклеотида от дНТФ на 3’-конец ДНК.
Условия хранения
Фермент Taq ДНК-полимеразу рекомендуется хранить при -20°C. Срок годности 1 год с даты проверки.
Контроль качества
ПЦР (активность), SDS-PAGE (качество очистки фермента), тест на нуклеазную активность, тест хранения при 25°С, тест на контаминацию E. сoli.
Условия хранения
Фермент Taq ДНК-полимеразу рекомендуется хранить при -20°C. Срок годности 1 год с даты проверки.
Контроль качества
ПЦР (активность), SDS-PAGE (качество очистки фермента), тест на нуклеазную активность, тест хранения при 25°С, тест на контаминацию E. сoli.
Рекомендуемые условия реакции
- Используйте 1-5 е.а. фермента на 100 мкл реакционной смеси.
- Конечная концентрация трифосфатов в реакционной смеси – 0.1-0.2 mM.
- Стадию элонгации проводить при 72°С, скорость амплификации составляет 1000-2000 п.о./мин.